牡丹和芍药种皮、种仁及种皮提取物中10种茋类成分含量及抗氧化测定(3)
时间:2016-07-09 14:37
来源:发表吧
作者:何春年等
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22种皮提取物及10种茋类成分抗氧化能力的测定
牡丹及芍药种皮提取物及10种茋类化合物抗氧化能力采用清除DPPH自由基的方法，参照相关文献[13]，即吸取稀释不同浓度的样品溶液各7 μL，分别添加到新鲜配置的193 μL的02 mmol·L-1浓度的DPPH溶液中，混匀，避光反应30 min，同时以生育酚（Trolox）作为对照，乙醇为空白对照，于517 nm波长处测定吸收度。按照以下公式计算DPPH自由基清除率。实验重复3次，求得清除率的平均值。以IC50（清除率大达50%时所需的浓度）作为抗氧化能力的强弱。
DPPH自由基清除率=（A0-A1）·A0-1×100/%
式中A1为测试样品吸收度；A0为空白对照的吸收度。
测定结果表明，牡丹种皮提取物（MD）和芍药种皮提取物（SY）及10种茋类化合物均具有一定的清除DPPH自由基活性，2种种皮提取物的IC50值分别为4910，5031 mg·L-1，无显著性差异；10种茋类化合物中suffruticosol B（2）和transresveratrol（4）的IC50值较低，分别为634，460 μmol·L-1，与生育酚相当（IC50 490 μmol·L-1），具有较强的清除DPPH自由基能力；化合物suffruticosol A的IC50最高，活性较弱，而其他7个茋类化合物活性一般。另外，结果也表明实验中的白藜芦醇及其低聚物随聚合度增加清除DPPH自由基能力无明显构效关系， 见图3。
1suffruticosol A； 2suffruticosol B； 3 suffruticosol C ； 4 transresveratrol ； 5 cisεviniferin ； 6 transεviniferin ； 7 cissuffruticosol D； 8 cisgnetin H； 9 transsuffruticosol D； 10 transgnetin H； MD 牡丹种皮提取物； SY 芍药种皮提取物； Trolox 生育酚。
图3牡丹和芍药种皮提取物及10种茋类化合物清除DPPH自由基能力
Fig3The removal ability of DPPH free radicals of peony seed coat extract and its ten stilbenes
3分析与讨论
天然茋类化合物（stilbenoids）是一类以1， 2二苯乙烯为骨架结构的天然多酚类化合物，代表性的为白藜芦醇和 combretastatin A4，前者潜在的营养和药用价值已被广泛认可，后者具有强的抑制微观蛋白多聚化已被修饰为磷酸化盐衍生物CA4P，目前作为甲状腺未分化癌治疗药物已处于临床Ⅲ期。
天然白藜芦醇低聚物是白藜芦醇在自然界通过低聚化和异构化等方式修饰产生的结构类型多样的一类数目最多的重要茋类化合物，除了作为天然的植物抗毒素外，具有多种药理活性[14]，如抗病原微生物（细菌、真菌和病毒）、抗肿瘤、抗氧化、雌激素样、抗炎和免疫调节等。许多研究表明一些茋类低聚体的抗氧化、抗肿瘤和抗炎活性明显强于其单体白藜芦醇，作用机制也不尽相同。激励国内外学者从中发现选择性高、毒副作用小的新型药物候选物和药物资源[1516]。然而由于结构复杂性使得缺乏有效的全合成方法[17]，同时该类化合物大多在自然界中含量低、难以分离和结构鉴定，限制了对其系统研究和开发。因此寻找高含量、活性强的茋类低聚体的植物资源，并在此基础上通过人工修饰、改善生物利用度和选择性是当前的主要手段。
本文研究表明，牡丹和芍药种子中白藜芦醇及其低聚物等茋类成分特征性地分布于种皮部位，含量达167%以上，明显高于目前已知的其他天然植物。而牡丹和芍药种仁仅含有少量的茋类成分，有利于对牡丹和芍药种子的分类利用。牡丹和芍药种皮中茋类成分经提取后能得到有效富集，总茋类成分含量在提取物中可达75%以上，有利于种皮中活性茋类成分的开发利用。
牡丹（包括油用和药用）植物人工栽培面积大，资源丰富，但在使用上其种壳作为废弃物未能得到有效利用，而白藜芦醇低聚物在种皮中含量高，这为将来开发利用提供了资源保障。另外，国内外学者和作者研究表明，牡丹种子中的茋类化合物具有多种生物活性，特别是抗肿瘤活性较强，对肺癌和乳腺癌细胞增殖的抑制浓度低，分别比白藜芦醇强20和68倍，且无明显毒性[6]，提示牡丹种皮中的茋类成分是重要的潜在药物资源。
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