[摘要] 目的 通过对黄瓜子不同炮制品中化学成分的对比分析，研究不同炮制方法对黄瓜子中化学成分的影响。 方法 分别用清炒法和微波炮制法对黄瓜子进行炮制，比较炮制品和生品中钙磷比、氨基酸及脂肪油含量的异同。 结果 黄瓜子生品钙磷比为2.79∶1，黄瓜子清炒品钙磷比为2.45∶1，黄瓜子微波制品钙磷比为2.26∶1；黄瓜子微波制品的氨基酸含量及脂肪油含量高于清炒品和生品。 结论 用微波法对黄瓜子进行炮制可提高黄瓜子的利用率。
[关键词] 黄瓜子炮制品；钙磷比；氨基酸；脂肪油
[中图分类号] R932 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2014）07（b）-0106-04
黄瓜子，异名哈利苏，为葫芦科植物黄瓜Cucumis sativus L.的干燥成熟种子。黄瓜子具有润肠清肺、接骨止痛和舒筋活络的功效，临床上常用于治疗劳伤咳嗽、骨折和跌打损伤之证[1]。在民间早已有用黄瓜子治疗骨科疾病的方法，且广泛用于接骨壮骨及日常补钙。黄瓜子中含有丰富的脂肪油，生食具有滑肠的作用。除特殊情况外，临床应用黄瓜子大多为黄瓜子的炮制品。目前对黄瓜子炮制方法的研究报道较少，根据传统中药炮制理论“逢子必炒”的原则，现在仍采用传统的清炒法炮制黄瓜子。本次试验运用微波炮制法对黄瓜子进行炮制，通过对比生品及两种炮制品中钙磷比、氨基酸及脂肪油的含量，比较炮制方法对黄瓜子中化学成分的影响。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
FAD04B型电子分析天平（1/10000），LXJ-IB型低速大容量多管离心机，Spectrumlab752S型紫外-可见分光光度计，电阻炉，GZX-9240型数显鼓风干燥箱，AS20500A型超声波清洗仪，HH-S型恒温水浴锅；精氨酸对照品、亮氨酸对照品、谷氨酸对照品及亚油酸对照品均购自中国生物制品研究所，蒸馏水、去离子水、其他试剂均为化学基准试剂或分析纯。
1.2 方法
1.2.1黄瓜子样品的炮制
黄瓜子购于吉林农业大学种子公司，经长春中医药大学药学院中药鉴定教研室鉴定为葫芦科黄瓜属黄瓜Cucumis sativus L.的干燥成熟种子。黄瓜子的不同炮制品均为自制。
1.2.1.1 黄瓜子生品 夏、秋季采收成熟的果实，剖开，取出种子，洗净，晒干。
1.2.1.2 黄瓜子清炒品 取黄瓜子生品500 g，置炒锅内，用文火炒至黄瓜子种皮鼓起且颜色加深，有噼啪声且伴有香气溢出时，取出，放凉。计算得率。
1.2.1.3 黄瓜子微波炮制品 取黄瓜子生品500 g，分次置于微波炉内，中等火力加热4 min，取出，放凉。计算得率。
1.2.2黄瓜子样品钙和磷的测定
1.2.2.1供试试剂的制备 ①混合酸消化液：分别取硝酸和高氯酸，按体积比4∶1的比例混合均匀，即得。②甲基橙指示剂：取甲基橙0.1 g，加水100 mL使溶解，即得。变色范围：pH 3.2～4.4（红→黄）。③乙酸溶液：取乙酸2 mL，加水稀释至10 mL，摇匀，即得。④氨水溶液：取氨水2 mL，加水稀释至10 mL，摇匀，即得。⑤4%草酸铵水溶液：取草酸铵4 g，加水溶解并稀释至100 mL，即得。⑥1 mol/L硫酸溶液：取浓硫酸60 mL缓缓注入适量水中，冷却至室温，加水稀释至1000 mL，摇匀，即得。⑦0.02 mol/L高锰酸钾标准溶液[3]：A.高锰酸钾标准溶液的配制：取高锰酸钾3.2 g，精密称定，溶于1000 mL水中，盖上表面皿，煮沸15 min，密塞，静置1周后，用垂熔玻璃滤器滤过，即得。B.高锰酸钾标准溶液的标定：取在105℃干燥至恒重的基准草酸钠0.2 g，精密称定，加水250 mL与浓硫酸10 mL，搅拌使溶解，自滴定管中迅速加入高锰酸钾标准溶液25 mL（边加边振摇，以避免产生沉淀），待褪色后，加热至65℃，继续滴定至溶液显微红色并保持30 s不褪色；当滴定结束时，溶液温度应不低于55℃，每1毫升高锰酸钾滴定液（0.02 mol/L）相当于6.70 mg的草酸钠。根据本液的消耗量与草酸钠的用量，算出高锰酸钾滴定液的浓度。⑧15%硫酸溶液：取15 mL浓硫酸缓慢加入到80 mL水中混匀，冷却后用水稀释至100 mL。⑨钼酸铵溶液：取钼酸铵5 g，精密称定，用15%硫酸溶液溶解并稀释至100 mL，摇匀，即得。⑩亚硫酸钠溶液：取亚硫酸钠10 g，精密称定，置50 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，mol/L；V：高锰酸钾滴定液消耗体积，mL；M：为Ca的相对原子质量，g/mol；V1：用于测定样品溶液体积，mL；V2：样品溶液定容总体积，mL；ms：样品的质量，g。
1.2.2.4 黄瓜子样品中磷含量的测定[11-12] ①磷标准曲线的制备：精密量取磷标准使用液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置于20 mL具塞试管中，加入2 mL钼酸铵溶液，摇匀并静置10 s，再依次加入1 mL亚硫酸钠溶液和1 mL对二苯酚溶液，摇匀，加水稀释至刻度，混匀后静置0.5 h，在660 nm波长下测定吸光度，以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标进行线性回归。②样品溶液中磷含量的测定：精密量取上述3种样品消化液各10 mL，分别置于100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液2 mL，置20 mL具塞试管中，其余操作步骤同“磷标准曲线的制备”项下的制备方法。根据测出的吸光度计算磷含量，具体公式为X=CV1/mV2，其中X：样品中磷含量，mg/g；C：由回归方程计算得的样品测定液中磷的含量，mg；V1：样品消化液定容体积，mL；V2：测定用样品消化液的体积，mL；m：样品质量，g。经测定，磷元素在磷含量5～50 μg范围内成线性关系，线性关系良好，回归方程：y=0.0114x-0.0108，r=0.9998，其中y为吸光度，x为磷含量（μg），结果见图1。
1.2.3 黄瓜子样品中氨基酸的薄层层析研究
取上述3种黄瓜子样品粉末各2 g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，加8倍量的蒸馏水浸泡30 min，超声提取20 min。过滤，滤液置恒温水浴锅上水浴蒸干，加80%乙醇溶解，过滤，制成5 mL的供试品溶液。取精氨酸对照品、亮氨酸对照品、谷氨酸对照品精密称定，分别加80%乙醇制成每1毫升含精氨酸10 μg，每1毫升含亮氨酸20 μg和每1毫升含谷氨酸20 μg的对照品溶液。精密吸取3种供试品溶液及3种对照品溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（3.5∶1∶1）为展开剂，展开；以0.2%的茚三酮乙醇溶液为显色剂，在110℃下加热10 min。
1.2.4 黄瓜子样品中脂肪油的研究
1.2.4.1 脂肪油的含量测定 取上述3种黄瓜子样品粉末各5 g，精密称定，分别置于索氏提取器中，以乙醚为提取溶剂，加热回流提取8 h，至脂肪油提尽，收集提取液，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上低温蒸干，蒸干后，将蒸发皿置烘箱中100℃干燥1 h，移置干燥器中，冷却30 min，精密称定，计算，即得。
1.2.4.2 黄瓜子样品中脂肪类成分的薄层层析研究 取上述3种黄瓜子样品的脂肪油各0.5 g，精密称定，分别置10 mL量瓶中，加石油醚溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取亚油酸对照品，加石油醚溶解制成每1毫升含有亚油酸1 mg的溶液，作为对照品溶液。精密吸取3种供试品溶液与对照品溶液各2 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯-甲酸（8.5∶1.5∶0.03）为展开剂，展距为15 cm，以5%的磷钼酸乙醇溶液为显色剂，于100℃下加热5 min。
2 结果
2.1 黄瓜子炮制品得率
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