花生壳中黄酮类化合物的抗氧化活性(2)

　　DPPH·自由基是一种以氮为中心的稳定自由基，其乙醇溶液为紫红色，在波长515 nm处有最大吸光度。此方法是基于抗氧化剂能给自由基提供氢原子或电子引起紫红色消褪来检测样品的抗氧化活性。自由基分为羟基自由基、烷基自由基、过氧自由基。若提取物能够清除DPPH·自由基，则表示它含有降低羟基自由基、烷基自由基、过氧自由基有效浓度的能力，可以有效阻断脂质过氧化反应，从而抑制氧化过程。抗氧化剂清除DPPH·自由基的清除率越高，其抗氧化能力越强。由图1可知，UEPS、SEPS对 DPPH· 自由基清除能力较强，并且清除率与黄酮含量呈正相关性，随着黄酮含量的增大，其对DPPH·自由基的清除能力也逐渐增强。UEPS、SEPS对DPPH·自由基的清除率均高于TBHQ，UEPS对 DPPH· 自由基的清除能力高于SEPS。
　　2.2ABTS+·自由基清除率
　　ABTS法可用于亲水性、亲脂性物质抗氧化能力检测，ABTS与过硫酸钾反应可生成稳定的蓝绿色工作液即ABTS+·自由基。向ABTS+·工作液中加入抗氧化剂，该抗氧化剂可与ABTS+·反应，ABTS+·将会减少，在734 nm处溶液的吸光度也发生变化，同时ABTS+·工作液褪色，褪色越明显，表明该抗氧化剂的抗氧化能力越强。由图2可知，UEPS、SEPS对ABTS+·自由基清除能力较强，并且清除率与黄酮含量呈正相关性，随着黄酮含量的增大，其对ABTS+·自由基的清除能力也逐渐增强。UEPS、SEPS对ABTS+·自由基的清除率均高于TBHQ，且UEPS对ABTS+·自由基的清除能力高于SEPS。
　　2.3总抗氧化能力
　　磷钼络合物法通常被用于酚类、维生素E、类胡萝卜素等抗氧化物的抗氧化活性测定，其原理是抗氧化物质中的氢或电子转移到Mo（Ⅵ）并将其还原成绿色的Mo（Ⅴ）络合物，其最大吸收波长为695 nm，吸光度越大，表示抗氧化剂活性越强。由图3可知，随着反应时间的延长，溶液的吸光度增大，即抗氧化剂的抗氧化活性逐渐增强。UEPS、SEPS抗氧化活性较高，总抗氧化活性的从强到弱依次为UEPS>SEPS>TBHQ。
　　2.4还原能力
　　测定还原能力是为了检验样品是否是一个良好的电子供给体，还原能力强的样品是良好的电子供给体，其供给的电子除了把Fe3+还原成Fe2+外，还可与自由基反应，生成稳定的物质。一般情况下，样品的还原能力与其抗氧化活性存在一定的相关性，样品的还原能力可间接反映其抗氧化能力。由图4可知，在所检测的浓度范围内，各个样品的还原能力随着黄酮含量的增加逐渐增强。当检测样品黄酮含量为 1.0 mg/mL 时，UEPS、SEPS、TBHQ在700 nm处对应的吸光度分别为1.956、1.455、0.721，表明不同提取法提取花生壳中黄酮类化合物具有一定的还原能力。在相同含量下，各个样品的还原能力由强到弱依次为UEPS>SEPS>TBHQ。
　　3结论
　　本研究表明，UEPS、SEPS、TBHQ均表现出不同程度的抗氧化能力。对DPPH·、APTS+自由基的清除能力由强到弱依次为UEPS>SEPS>TBHQ。花生壳提取出的黄酮类化合物抗氧化活性均高于合成抗氧化剂TBHQ，且超声波辅助提
　　取法提取花生壳中黄酮类化合物的抗氧化活性明显高于索氏萃取法提取花生壳中黄酮类化合物的抗氧化活性。可见，超声波辅助提取法是一种提取天然活性成分的有效方法。
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