顺铂对正常星形胶质细胞的影响(2)

　　2结果

　　2.1利用倒置显微镜下观察正常传代培养的9L胶质瘤细胞和传至第四代的原代神经胶质细胞，如图（1）。

　　2.2原位末端标记法检测：经顺铂作用的正常神经细胞内未见棕褐色颗粒（图2A）9L胶质瘤细胞内可见棕褐色颗粒（图2B）。

　　2.3Annexin-v-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡：如图3所示，所得结果经SPSS13.0统计软件分析，经在4μg/ml的顺铂处理72小时后，9L细胞的凋亡率为（）：15.62±0.38；正常神经细胞的凋亡率为（）：2.56±0.25。经t检验t=61.273，P<0.001，差别具有统计学意义。

　　3讨论

　　目前的研究表明：胶质瘤发病率占颅内肿瘤的44%[4]，其死亡率极高。术后易复发。目前还无有效地治疗手段。找到适合的化疗药物及合理治疗浓度是我们所要追求的结果。顺铂可用于恶性胶质瘤化疗并可诱导其凋亡。顺铂的诱导凋亡主要使Bax基因表达增高[5]，因Bax与Bcl-2的比值增大导致细胞对任何诱导凋亡的刺激变为敏感，更易出现凋亡[6]。那么可以最大程度杀伤肿瘤细胞而最低程度影响正常神经细胞就是本实验研究所解决的关键问题。

　　本实验在基础上研究了顺铂对质瘤细胞和正常神经细胞的促凋亡作用是否相同。TUNEL形态学观察结果可见，顺铂处理后的9L胶质瘤细胞株发生明显的凋亡形态学改变，而正常神经胶质细胞凋亡改变少见。本实验Annexin-v-FITC/PI双标记法流式细胞仪结果显示9L胶质瘤细胞4μmol/ml顺铂作用72小时下，凋亡率明显高于正常神经胶质细胞。通过以上实验说明顺铂促凋亡作用具有一定的选择性。

　　本实验发现，顺铂在诱导9L胶质瘤细胞明显凋亡的同时对正常神经胶质细胞的生长抑制及促凋亡作用较小，因此可为临床治疗神经系统肿瘤提供实验室依据，即应用顺铂治疗胶质瘤时，在合理有效的治疗浓度下可有效杀伤肿瘤细胞，而对正常脑细胞影响较小。

　　参考文献：

　　[1]OlivePL，WlodekD，BanathJP.DNAdouble-strandbreaksmeasuredinindividualcellssubjectedtogelelectrophoresis[J].CancerRes，1991，51（17）：4671-4676

　　[2]CichonJ，SunC，ChenB，etal..Cofilinaggregationblocksintracellulartraffickingandinducessynapticlossinhippocampalneurons.JBiolChem2012；287（6）：3919–3929.

　　[3]Labat-MoleurF，GuillennetG，LorimierP，etal.TUNELapoptoticcelldetectionintissuesections：criticalevaluationandprovementcriticalevaluationandimprovement[J].JHistochemCytochem，1998，46（3）：327-334