冷冻法处理带毒灰飞虱研究初报(2)

　　表1不同冷冻时间处理后灰飞虱的状态
　　冷冻时间
　　（min）复苏时间
　　（s）灰飞虱死亡率
　　（%）100020701.4830944.764011717.655015017.396015917.65
　　2.2冷冻灰飞虱对其传毒能力的影响
　　经-20 ℃冷冻处理20 min的带毒灰飞虱接种武育粳3号后的发病率略低于不经冷冻带毒灰飞虱处理灰飞虱所接种水稻的发病率，可是显著性分析发现两者间无显著性差异（表2），可见冷冻处理对带毒灰飞虱传播水稻条纹病毒的能力无影响。
　　表2冷冻对灰飞虱传毒能力的影响
　　处理平均发病率
　　（%）5%显著水平1%极显著水平不冷冻50.56aA冷冻45.04aA
　　2.3冷冻灰飞虱对其羽化的影响
　　经-20 ℃冷冻处理20 min后灰飞虱的平均羽化率达88.81%，与非冷冻处理的灰飞虱羽化率100%进行假设测验知，差异性不显著，说明冷冻对灰飞虱的羽化影响不大 （表3）。继续观察发现，经-20 ℃冷冻处理的灰飞虱所产后代羽化后，成虫仍可产卵并孵化，初步表明-20 ℃冷冻处理 20 min 对灰飞虱交配产卵机能影响不大，其生活史不会因 -20 ℃ 冷冻20 min而受影响。
　　3讨论与结论
　　水稻条纹叶枯病重病区田间鉴定方法具有方便、快捷等优点，但是抗性鉴定结果易受环境条件的影响，使得年度和区域间灰飞虱发生量和带毒率的具有不均一性，从而在一定程度上影响结果的重演性[10]。苗期接种鉴定方法是在可控条件下开展的一种抗性鉴定，利用其评价水稻品种对水稻条纹叶枯病的抗性水平，除了可以很好地克服环境条件的影响，拓宽鉴定时间，还满足了对大量材料进行快速鉴定的需求[7]。鉴定过程中发现，传毒介体灰飞虱的移动性较强，使得定量接
　　表3冷冻对灰飞虱羽化的影响
　　编号总虫数
　　（头）羽化数
　　（头）羽化率
　　（%）1423788.10 2322887.50 3232191.30 4322887.50 5292689.66 平均〖4〗88.81
　　种灰飞虱成为一件操作复杂而繁琐的工作，曾对研究进度带来了一定影响，进而对冷冻法处理带毒灰飞虱进行了研究，不仅大大加快了水稻条纹叶枯病接种鉴定的速度，还为灰飞虱传病毒病的接种鉴定提供了一种处理携带病毒灰飞虱的新方法，进而加快了抗病品种的鉴出速度和选育进程。
　　携带RSV的灰飞虱-20 ℃冷冻处理20 min后，不仅方便计数，而且对其传毒能力和羽化影响不大，不会影响其对水稻条纹病毒的传播，继续饲养发现对其产卵机能影响也不大，其生活史不会因-20 ℃冷冻20 min而受到影响，但其交配与产卵能力的大小是否受影响还须要进一步试验。这与刘向东等报道灰飞虱能抵抗一定低温并忍受一定高温，在江苏南部灰飞虱越冬期不休眠，仅在-3 ℃且持续时间较长时才发生麻痹冻倒现象，冻倒若虫大部分能复苏的结论[11]基本一致。
　　参考文献：
　　[1]Toriyama S. Rice stripe virus（set 17）[M]. CMI /ABB： Description of Plant Viruses，1983.