PCNA在卵巢癌患者肿瘤组织中的表达及意义(2)

　　1.2试剂和方法：PCNA兔抗人单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司。本实验采用免疫荧光组织化学方法，以PBS代替一抗作空白对照。

　　1.3结果判定：PCNA以胞核中出现红色颗粒为阳性，免疫组化根据阳性细胞所占比例及荧光强度分别记分O～3分。（1）荧光强度：无荧光或极弱的荧光为0分，荧光较弱但清楚可见为1分，荧光明亮为2分，荧光闪亮为3分。（2）阳性细胞百分比：高倍镜（×400）下随机选取10个视野，每个视野计数100个细胞。取平均值作为阳性细胞百分数。阳性细胞数<5%为O分，阳性细胞数5%～25%为1分，阳性细胞数26%～50%为2分，>50%为3分。（3）根据这两项指标的计分和分为4级，即O～1分为阴性（一），2分为弱阳性（+），3～4分为阳性（++），5～6分为强阳性（+++）。

　　1.4统计学分析：应用SPSS13.0统计软件进行数据处理。进行卡方检验等统计学分析。P<0.05认为有统计学意义。

　　2结果

　　2.1PCNA在良性、恶性卵巢肿瘤的表达总阳性率分别为15%、65.2%，有显著性差异（P<0.01），见表1。

　　2.266例卵巢癌中PCNA的表达与临床分期、组织分化、淋巴结转移的关系表明，PCNA表达总阳性率与临床分期无关（P=0.435），但阳性+强阳性率在临床Ⅰ、Ⅱ期明显低于Ⅲ、Ⅳ期（P<0.05）；有淋巴结转移组的PCNA的总阳性率及阳性+强阳性率均较无淋巴结转移组的高（P<0.05），见表2。

　　3讨论

　　卵巢肿瘤是女性生殖器常见肿瘤，由于缺少有效的早期诊断方法，卵巢恶性肿瘤5年存活率至今仍较低，PCNA为与细胞增殖活性相关的蛋白；近几年，分子肿瘤学研究表明，细胞周期调节失控在恶性肿瘤发生中起着关键作用。PCNA随细胞增殖周期的不同而变化，G1后期开始增加，S期达高峰，G2、M期又降低，其变化与DNA合成一致，这说明PCNA参与DNA合成，而DNA的合成又是肿瘤细胞分裂增殖的必要条件。因此，被视为能较可靠地反映细胞群体增殖活性的客观指标。国外学者对全身不同部位的癌肿进行PCNA免疫组化研究，多数认为PCNA与肿瘤组织分级、临床分期、淋巴结或脏器转移及不良预后有关[3，4]。

　　本实验结果同时显示：PCNA的表达总阳性率与卵巢癌的临床分期、组织分化、淋巴结转移均相关，即PCNA表达在临床分期Ⅰ-Ⅱ期、高分化、无淋巴转移组明显低于临床分期Ⅲ-Ⅳ期、低分化、有淋巴转移组，提示PCNA表达与卵巢癌的进展及癌细胞的增殖、转移有关，这一结果与文献报道一致[5，6]。

　　因此，测定PCNA表达对鉴别卵巢肿瘤的良恶性、估计卵巢癌预后有一定的实用价值。

　　参考文献：