湖北板栗品种对栗疫病抗性的鉴定与筛选

　　摘要：分别于夏季和冬季2个时期，在31份湖北板栗（Castaneamollissima）品种（类型）资源的离体枝条上接种栗疫病病菌菌株C（Cryphonectriaparasitaca），观察各品种（类型）资源感染栗疫病的潜伏时期，测定接种20d时的发病率和病斑面积，综合评价各品种（类型）对栗疫病的抗性，筛选出抗性品种（类型）。综合夏季和冬季2个时期试验，结果表明，红毛早、中迟栗、鄂栗1号、罗田浅刺、红光油栗5个品种（类型）为高抗栗疫病材料，宣化红、罗田乌壳栗、腰子栗、大果中迟栗、金优3号、母圃1号、京山浅刺、青毛早8个品种（类型）为抗性材料；夏季接种栗疫病病原菌的板栗品种枝条对栗疫病抗性程度强于冬季。
　　关键词：板栗（Castaneamollissima）；栗疫病；枝条接种；抗病性鉴定；抗性品种
　　中图分类号：S156.2；S572文献标识码：A文章编号：0439-8114（2013）24-6060-04
　　板栗（Castaneamollissima）是中国栽培的主要干果，亦是湖北省的第一大干果，截至2010年，湖北省板栗种植面积达24万hm2，总产量13.65万t，总产值10亿余元，已成为山区农民致富奔小康的支柱产业之一[1]。栗疫病是板栗生产中的重大病害，从20世纪初开始几乎完全毁灭了美洲栗，欧洲各国的欧洲栗生产也早已蒙受了巨大损失[2]。中国板栗一直被认为是对栗疫病抗性最强的一个种[3]，但在中国栗疫病仍造成了不同程度的危害[4，5]，局部地方发病率高达60%，被害板栗树轻则树势衰弱，影响产量，重则树干溃烂，全株死亡，栗疫病对板栗资源仍存在巨大的潜在威协，是中国板栗产业健康发展所不容忽视的问题。
　　有效防治栗疫病危害是人们一直努力的目标。研究和实践证明，选择栽培抗病品种是规避栗疫病危害风险最经济有效的办法。中国板栗资源丰富，又是公认的对栗疫病抗性最强的一个种，通过抗栗疫病鉴定评价可筛选出抗性资源。对栗疫病抗性鉴定方法多采用简便易行的枝条离体接种栗疫病病原菌方法[6]。目前对栗疫病抗性鉴定的种质材料主要是中国北方板栗种质材料[7，8]，南方种质材料较少，截至目前还未见到系统的湖北省板栗品种的栗疫病抗性鉴定报道。
　　针对上述情况，以31份湖北省板栗栽培品种（类型）为材料，分别于夏季和冬季2个时期，采用离体枝条接种法，通过观察与测定各品种资源对栗疫病的感抗，确定各品种对栗疫病的抗性，筛选出抗性品种，旨在为中国板栗生产提供可选择的抗栗疫病品种和为抗栗疫病育种提供亲本基因材料。
　　1材料与方法
　　1.1板栗材料
　　试材取自湖北省农业科学院果树茶叶研究所板栗资源圃内，共31个湖北省现栽板栗品种类型。在冬季和夏季分别采集供试板栗品种枝条，每品种选取一年生直径1cm的枝条30枝供接种用。
　　1.2供试菌株
　　供试菌株采用作者分离与通过鉴定的栗疫病病原菌菌株C（Cryphonectriaparasitaca）[9]。菌株C分离自湖北省罗田县受栗疫病自然侵染的板栗园，经菌株形态特征和致病性检测，菌株C为典型的栗疫病病原菌，且为强毒力菌株。
　　1.3枝条消毒和离体接种
　　将采集的枝条杀菌消毒后晾干，用5mm打孔器在枝条上打孔，深至木质部，取出树皮，将5mm菌丝块接种于板栗枝条孔内，于25℃光照保湿培养，7d后移除菌丝块，从第10天开始记录各处理枝条发病率和病斑纵横径，以椭圆面积公式计算出病斑面积，每5d记录1次，直至25d。以空白琼脂块为对照，每处理10个孔，3次重复。
　　1.4抗性评价指标
　　以接种20d时调查所得的数据计算各品种发病率和病斑面积，按照表1方法划分抗性等级。
　　2结果与分析
　　2.1不同板栗种质资源、不同季节接种后潜伏期的差异
　　31份板栗材料分别在冬季和夏季接种栗疫病病菌，病原菌在枝条中的潜伏期见表2。冬季接种试验中，在31份板栗材料中的栗疫病平均潜伏期为6.6d，八月红、中迟栗、罗田浅刺、罗田红栗、红毛早、鄂栗1号、通山1号7个品种（类型）潜伏期都在8.0d及以上，表现出较高的抗性，青毛早和金优2号潜伏期短，发病快；夏季接种试验中，栗疫病在各板栗材料中的平均潜伏期为5.7d，金优3号、六月暴、中迟栗、红毛早、鄂栗1号、早2001、早2002和花桥1号8个品种（类型）潜伏期在8.0d及以上，表现出较高的抗性，金栗王潜伏期仅为1.3d，发病最早。
　　综合2次接种试验结果，31份板栗材料在冬季接种试验中的总平均潜伏期要略长于夏季，但无显著差异，其中，中迟栗、罗田浅刺、红毛早、鄂栗1号4个品种（类型）在2次接种试验中均表现为潜伏期长、发病晚。
　　2.2不同板栗种质资源、不同季节接种后发病率的差异
　　31份湖北省板栗品种（类型）接种栗疫病病菌20d后均表现出不同程度的栗疫病症状，2次试验发病率见图1。冬季接种试验中，31份板栗材料平均发病率为67.79%，其中，红毛早发病率仅为18.18%，表现为高抗，罗田浅刺表现为抗，罗田乌壳栗、中迟栗、罗田红栗、红光油栗、青毛早、乐杨2号、鄂栗1号等7个品种（类型）表现为中抗。夏季接种试验中，31份板栗材料平均发病率为49.14%，六月暴、红毛早、鄂栗1号和花桥1号4个品种（类型）发病率低于20%，表现出高抗；金优1号、金优3号、母圃1号、大果中迟栗、罗田乌壳栗、中迟栗、罗田浅刺、红光油栗、重阳栗、早2001、早2002和宣化红12个品种（类型）表现为抗。
　　综合2次试验结果，31份板栗品种（类型）在冬季接种试验中平均发病率要显著高于夏季，其中红毛早、罗田浅刺、鄂栗1号、罗田乌壳栗、中迟栗和红光油栗6个品种（类型）在2次试验中均表现出较强的抗性。
　　2.3不同板栗种质资源、不同季节接种后病斑大小的差异
　　31份湖北板栗品种（类型）在2次试验中接种栗疫病病菌20d后病斑面积调查结果如图2所示。冬季接种试验中，31份材料平均总病斑面积为13.82cm2，中迟栗、罗田浅刺、红毛早3个品种表现为高抗，金优3号、母圃1号、大果中迟栗、罗田乌壳栗、红光油栗、京山浅刺、乐杨2号、鄂栗1号、通山1号、花桥2号10个品种（类型）表现为抗。夏季接种试验中，31份材料平均总病斑面积为14.41cm2，金优3号、母圃1号、六月暴、中迟栗、红毛早、鄂栗1号、早2002、宣化红和花桥1号9个品种（类型）表现为高抗，金优1号、大果中迟栗、罗田乌壳栗、罗田桂花香、罗田浅刺、红光油栗、重阳栗、京山浅刺、乐杨1号、早2001和腰子栗11个品种（类型）表现为抗。
　　综合2次试验结果，31份板栗品种（类型）中，金优3号、母圃1号、大果中迟栗、罗田乌壳栗、中迟栗、罗田浅刺、红光油栗、京山浅刺、红毛早和鄂栗1号10个品种（类型）在病斑面积这一抗性指标上表现出较强的抗性。