市售杜仲茶中主要成分含量的测定(2)

　　4制备及标准曲线的绘制
　　4.1标准品的制备
　　称取一定量的京尼平苷酸[1]和桃叶珊瑚苷用甲醇溶解，配成浓度为1毫克/毫升的混合标准品标准液。称取一定量的芍药苷，用甲醇溶解，配成浓度为100纳克/毫升的标准液。用200微克的空白血浆、100毫升的芍药苷标准液、100毫升的混合标准品标准液（经稀释），混合后使得混合标准品的浓度分别为0.192，0.96，4.8，24，120，600，3000纳克/毫升。涡旋30秒后12000转/分离心10分钟取上清液。
　　4.2血样的制备
　　血浆样品制备血样于12000转/分离心10分钟后取血浆200微克，加入100毫升的混合标准品溶液，100毫升芍药苷，涡旋30秒，12000转/分离心10分钟，取上清液进行血浆中京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷的LC-MS/MS测定。
　　4.3标准曲线的绘制
　　用内标法绘制京尼平苷算和桃叶珊瑚苷[2]的标准曲线，芍药苷为内标。
　　5大鼠给药
　　大鼠以每克体重给药1毫克的给药量进行口服给药，取血时间为0，0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4，5，6，8，10，12，24h。根据标准曲线测出血样中京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷的含量，绘制药时曲线。
　　6实验结果
　　6.1标准曲线
　　图1京尼平苷酸标准曲线
　　根据测得京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷和混合标准品也内标芍药苷相应的浓度及峰面积，绘制出相应标准曲线图1、图2。其中京尼平苷酸的标准曲线为y=2.041x+0.1482，R2=0.9999，桃叶珊瑚苷的标准曲线为y=7.9851x+0.5673，R2=0.9998。
　　图2桃叶珊瑚苷标准曲线
　　6.2给药后血样中含量的测定
　　图3京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷药时曲线
　　根据所绘制的京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷的标准曲线，对大鼠口服给药后血样中京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷对应的时间点和浓度作药时曲线图。
　　7结论
　　原料经处理后给药，从药时曲线中可以看出，京尼平苷酸最大浓度可达大概45纳克/毫升，而桃叶珊瑚苷只能达到25纳克/毫升左右，浓度值略低，可考虑使用氯仿或四氯化碳等其他常见有机溶剂进行萃取。
　　参考文献
　　[1]彭婕，钱之玉，等.京尼平苷和西红花酸保肝利胆作用的比较.中国新药杂志，2003（2）.
　　[2]成龙，杨红军，等.京尼平苷及京尼平的药代动力学研究-排泄动力学.第六次全国中西医结合中青年学术研讨会.2009.