黄连与药物配伍对抑菌作用的影响研究(2)

时间:2013-05-15 15:27 来源:发表吧作者:admin 点击: 次

2.       测定中药煎剂中的小檗碱含量
2.1    制备煎剂样品
在制备标准品溶液时，首先在105℃的温度下降1.6mg的盐酸小檗碱标准品精确称取出来，然后将其放置在100ml的容量瓶中，向里面加入适量的水到刻度，使其溶解，得到16ug/ml浓度的溶液，然后摇匀备用。
2.2    测定煎剂含量
将1ml的样品溶液精密吸取出来，对个样品中的黄连总生物碱的含量进行测定，从而将损失率计算出来。
3.       黄连和黄连与药物配伍中药抗菌作用
3.1    制备供试液
在制备黄连供试液时，首先将1ml上述制备的黄连煎剂精密量取出来，将其放置在10ml的容量瓶中，然后加入磷酸缓冲液到刻度，最后将其摇匀^[2]；在制备黄连和甘草供试液时，首先将1ml上述制备的黄连和甘草煎剂精密量取出来，下面操作同上。
3.2    制备鉴定菌悬液
将金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌取出来，在普通肉汤琼脂斜面接种，在37℃的温度下培养18个小时，然后用10ml的肉汤培养基对下菌苔进行清洗，将其稀释为0.1倍的均匀悬液，放置备用。
3.3    抑菌实验
在对双碟进行制备时参照《中国药典》95版二部附录方法，获取清晰的抑菌圈是菌层加菌的限度。将10ml的上述供试液加入到不锈钢管中之后，在37℃的温度下培养16~18个小时，然后对抑菌圈直径进行测定。统计结果分别如表1所示。
表1 配伍后黄连总生物碱含量及抑菌作用

样品	金黄色葡萄球菌			痢疾杆菌
样品	含量（g）	损失率（%）	抑菌圈直径（mm）	含量（g）	损失率（%）	抑菌圈直径（mm）
黄连	0.6232	-	25.0	0.6232	-	28.1
甘草+黄连	0.3998	35.85	19.1	0.3998	35.85	22.4
大黄+黄连	0.3389	45.62	24.2	0.3389	45.62	24.1
金银花+黄连	0.3001	51.85	20.1	0.3001	51.85	23.8
黄芩+黄连	0.2418	61.20	22.4	0.2418	61.20	26.3
栀子+黄连	0.4139	33.58	19.8	0.4139	33.58	21.8

和药物配伍会在一定程度上减弱黄连的抑菌作用，而小檗碱的损失程度是决定减弱程度的关键因素，但不是唯一因素。由此我们可以得出，在研究中药配伍对黄连抑菌作用的影响时，我们应该对配伍药物相关活性成分的变化给予充分的考虑。

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