大孔树脂吸附解吸甘草黄酮效果研究(2)

　　2.4.2上样液流速对甘草黄酮吸附效果的影响取5支层析柱，黄酮溶液浓度为2.0mg/mL，分别以1.0、1.5、2.0、2.5、3.0BV/h流速进行动态吸附，每次2h，收集残液（每30min收集1次），准确记录残液体积，测定残液中黄酮的吸光度，计算黄酮的吸附率。

　　2.4.3上样量对甘草黄酮吸附效果的影响分别取2.0mg/mL甘草黄酮溶液1～7BV，进行吸附试验，测定大孔树脂对甘草黄酮的吸附效果。

　　2.4.4洗脱剂浓度对甘草黄酮解吸效果的影响取5份2.0mg/mL甘草黄酮溶液2BV，分别加入5根树脂柱，以1.5BV/h流速通过后，用体积分数50%、60%、70%、80%、90%的3BV乙醇洗脱，控制解吸速率为2BV/h，收集各自流出液，测定其中黄酮含量，计算黄酮解吸率。

　　2.4.5洗脱速率对甘草黄酮解吸效果的影响取5份2.0mg/mL甘草黄酮溶液2BV，分别加入5根树脂柱，以1.5BV/h流速通过后，用体积分数80%乙醇以1、1.5、2、2.5、3BV/h速率洗脱，收集洗脱液，测定其中黄酮含量，计算黄酮解吸率。

　　2.4.6洗脱剂用量对甘草黄酮解吸效果的影响取5份2.0mg/mL甘草黄酮溶液2BV，分别加入5根树脂柱，以1.5BV/h流速通过后，用体积分数80%乙醇，1.5BV/h速率，1、2、3、4、5BV乙醇量洗脱，收集洗脱液，记录洗脱液体积，测定其中黄酮含量，计算黄酮解吸率。

　　3结果与分析

　　3.1大孔树脂静态筛选结果

　　3.1.1树脂静态筛选及吸附、解吸性能比较选择8种大孔吸附树脂，测定黄酮吸附平衡质量浓度，得到大孔树脂对初始液中黄酮的吸附情况，利用体积分数70%乙醇对吸附饱和树脂进行解吸能力测定，结果见图1。可以看出，ADS-7、HPD300、S-8大孔树脂的黄酮吸附率比较大，其中HPD300、S-8有较高的解吸率。

　　图18种大孔树脂对样品中黄酮的静态吸附和解吸结果

　　3.1.2静态吸附动力学研究为进一步确定3种大孔树脂吸附解吸效果，需做静态吸附动力学试验研究。3种树脂吸附甘草黄酮的动力学过程见图2，ADS-7大孔树脂在起始阶段吸附量小，而且达到吸附平衡时间很长，但饱和吸附量较大。HPD300型大孔树脂对黄酮的吸附量，在实验初期随时间的增加而迅速增大，而后期吸附量的增加有所减小。从总体上来看，HPD300的吸附率优于ADS-7。综合以上分析可知，HPD300树脂对甘草黄酮具有良好的静态吸附动力学特性，较适于甘草黄酮的分离。

　　图23种树脂的静态吸附动力学曲线

　　3.2HPD300大孔吸附树脂对甘草黄酮的动态吸附解吸结果

　　3.2.1上样液浓度对甘草黄酮吸附效果的影响不同上样液浓度对甘草黄酮吸附效果的影响见图3。可见，在较低样品浓度区间内，随着上样浓度增加，树脂吸附率增大；在上样浓度为2.0mg/mL左右，树脂具有最大吸附率，之后吸附量基本保持不变；但当浓度大于2.5mg/mL后，树脂吸附率反而下降。这是由于上样浓度大于树脂的吸附饱和度导致的。故上样液初始浓度以2.0mg/mL为宜。

　　图3上样液浓度对甘草黄酮吸附效果的影响

　　3.2.2上样液流速对甘草黄酮吸附效果的影响不同上样液流速对甘草黄酮吸附效果的影响见图4。可见，上样流速较慢时，被吸附物与树脂接触的时间长，有利于其从液相扩散到树脂内部，从而提高吸附率；当样品流速过快时，样品中黄酮未被吸附即流出，不利于吸附的进行。因此，较慢的样品流速有利于吸附，但流速过慢会导致完全吸附时所需时间较长[8]。因此，综合考虑时间与吸附率因素，上样流速以1.5BV/h较为合适。

　　图4上样液流速对甘草黄酮吸附效果的影响

　　3.2.3上样量对甘草黄酮吸附效果的影响不同上样量对甘草黄酮吸附效果的影响见图5。在甘草黄酮溶液1、2BV时，吸附率随上样量的增加而增加；超过2BV，吸附率逐渐下降，并趋于平稳。树脂的上样量为2BV吸附率较高。

　　图5上样量对甘草黄酮吸附效果的影响

　　3.2.4洗脱剂浓度对甘草黄酮解吸效果的影响不同洗脱剂浓度对甘草黄酮解吸效果的影响结果见图6。随着洗脱剂浓度增大，解吸率曲线总体呈上升趋势，但当洗脱剂浓度大于80%时解吸率便有下降趋势，可见，当洗脱剂浓度为80%左右时解吸效果最好，故选用80%乙醇作为解吸剂。

　　图6洗脱剂浓度对甘草黄酮解吸效果的影响

　　3.2.5洗脱速率对甘草黄酮解吸效果的影响不同洗脱速率对甘草黄酮解吸效果的影响见图7。随着洗脱速率增大，其解吸率曲线总体呈下降趋势，当洗脱速率为1.5BV/h左右其解吸率最大，可见，洗脱速率为1.5BV/h左右时解吸效果最好故选用洗脱速率为1.5BV/h进行解吸。

　　图7洗脱速率对甘草黄酮解吸效果的影响

　　3.2.6洗脱剂用量对甘草黄酮解吸效果的影响不同洗脱剂用量对甘草黄酮解吸效果的影响见图8。随着洗脱剂用量增多，其解吸率曲线呈上升趋势，但洗脱剂用量为3BV后，其解吸率增幅变小，因此，本试验选用3BV为洗脱剂用量。

　　图8洗脱剂用量对甘草黄酮解吸效果的影响

　　4讨论

　　采用静态吸附筛选树脂，考察吸附过程中的静态吸附平衡、动态吸附过程、动态吸附确定最佳吸附和洗脱工艺，发现HPD300树脂的吸附、洗脱性能最佳。用HPD300树脂吸附甘草黄酮溶液中黄酮时的最佳动态吸附条件为：吸附过程，上样浓度为2.0mg/mL，上样流速为1.5BV/h，上样量为2BV；洗脱过程，洗脱液浓度为80%乙醇水溶液，洗脱速率为1.5BV/h，用量3BV。用优化条件进行甘草黄酮的纯化，得到的黄酮纯度比纯化前提高2倍以上。说明HPD300型大孔吸附树脂对甘草中