荷斯坦奶牛粪便中双歧杆菌的分离鉴定与耐药性分析(2)

　　2.2 生化试验结果

　　生化试验结果见表1。

　　2.3 药敏试验

　　由表2可以看出，双歧杆菌对克拉霉素、链霉素、洁霉素、青霉素等有一定的耐药性，而对其余的几种抗生素如氟苯尼考、四环素、诺氟沙星等表现为敏感。药敏试验结果见图3、表2。

　　3 结论与讨论

　　（1）通过试验分离得到的两株菌株在改良的MRS培养基上均出现蓝色的菌落，在TPY培养基上的边缘整齐，乳白色，光亮质地柔软。经革兰染色镜检为阳性末端分叉的杆菌，结果与资料记载相符[3]，结合《伯杰氏细菌鉴定手册》[4]确定此菌为长双歧杆菌。本研究采用划线分离、染色镜检、生化试验等方法进行了细菌分离鉴定，但目前的细菌分离鉴定多采用16sDNA序列分析来提高结果的准确性，该方法是根据细菌16sDNA的同源性来帮助鉴定细菌的。本研究虽然没有采用这种方法，但是根据以上试验结果得出的结论也能做出判断。

　　（2）双歧杆菌作为乳酸菌中的重要一员，其生理功能被不断揭示。双歧杆菌能够与其他厌氧菌一起共同占据肠黏膜表面，在肠黏膜表面，双歧杆菌与其他厌氧菌为协同作用，它们与肠黏膜上皮细胞结合形成一个生物学屏障，这个生物学屏障能够阻止细菌毒素及致病菌对肠黏膜上皮细胞的黏附和定殖[5-6]。临床上使用微生态制剂时，应特别注意与抗菌药物的配伍禁忌，以防止由于抗菌药物对细菌的敏感作用而影响微生态制剂的活性和功效。有文献记载，双歧杆菌菌株对氯霉素、万古霉素和红霉素以及抑制革兰氏阳性菌生长的抗生素酶类敏感， 对氨苄青霉素中度敏感[7]，但对庆大霉素、丁胺卡那霉素却表现出强耐受性[8]。因此， 同时应用双歧杆菌制剂和抗菌药物时应该避免同时服用 [9]。杜敏等[10]认为，双歧杆菌是肠道微生物区系中典型的对机体有百利而无一弊的有益菌，对肠道内多种微生物都有一定调整作用，并且对致病菌有一定拮抗作用，有助于改善肠道环境。该特性利于动物肠道系统建立正常菌群，保持体内生态平衡。

　　参考文献：

　　[1] 丛佩清. 奶犊牛直肠主要正常菌群的检测及其定植规律的研究[J]. 云南大学学报，1999，21（3）：219-221.

　　[2] 姚火春. 兽医微生物学实验指导[M]. 北京：中国农业出版社，2002：36-39.

　　[3] James A. Bifidobacteria [J]. Bacteriological Rivers，1973，48（6）：136-142.

　　[4] R E 布坎南，N E 吉本斯.伯杰细菌鉴定手册 [M]. 8版.北京：科学出版社，1999.

　　[5] Singh V P，Sharma J，Babu S，et al.Role of probiotics in health and disease：A review [J].J Pak Med Assoc，2013，63（2）：253-257.

　　[6] Jirillo E，Jirillo F，Magrone T. Healthy effects exerted by prebiotics，probiotics，and symbiotics with special reference to their impact on the immune system [J].Int J Vitam Nutr Res，2012，82（3）：200 -208.

　　[7] 郭本恒. 益生菌[M]. 北京：化学工业出版社，2003：23-25.

　　[8] 李少英，李培锋，石晶红. 奶牛源双歧杆菌的分离及耐药特性[J]. 中国乳品工业，2008，36（1）：4-12.

　　[9] 李健，袁佩娜. 双歧杆菌耐药性和质粒[J]. 中国微生态学杂志，1999，27（3）：179-180.

　　[10] 杜敏，南庆贤，龚海岩，等. 双歧杆菌及其保健机理[J]. 食品与发酵工业，1995（2）：81-83.